高效液相色譜是20世紀(jì)60年代后期發(fā)展起來(lái)的分離分析技術(shù)，是現(xiàn)代分離測(cè)定的重要手段。問(wèn)世以來(lái)，因其具有分離效能高、分析速度快、檢測(cè)靈敏度好、能分析高沸點(diǎn)但不能氣化的熱不穩(wěn)定生理活性物質(zhì)的特點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、藥物及臨床分析。

　　kromasil色譜柱是高效液相色譜的心臟，在高效液相色譜儀的使用中，保持kromasil色譜柱的柱效、容量和滲透特性，延長(zhǎng)柱子的使用壽命非常重要。盡管經(jīng)過(guò)數(shù)十年的發(fā)展，出現(xiàn)了各種各樣的kromasil色譜柱，如制備柱、分析柱和各種微型柱，但kromasil色譜柱主體上仍由柱體、柱內(nèi)填料和兩端的接頭組成。由于使用了高效填料，并不需要很長(zhǎng)的柱長(zhǎng)，常規(guī)分析柱多為15~30 cm的直型柱。由于高效液相kromasil色譜柱要承受系統(tǒng)高壓，所以柱體一般選用金屬材質(zhì)。大部分kromasil色譜柱的接頭為通用尺寸，可互換使用。

　　kromasil色譜柱的正確使用

　　1、加裝保護(hù)柱：保護(hù)柱屬消耗品，經(jīng)過(guò)一定次數(shù)的樣品分析(50~100次)后，出現(xiàn)柱壓顯著升高或峰形變壞或基線(xiàn)漂移時(shí)，應(yīng)考慮更換保護(hù)柱。

　　2、過(guò)濾流動(dòng)相和樣品 ：流動(dòng)相通常由水或緩沖溶液與有機(jī)溶劑混合而成，原則上，所有經(jīng)過(guò)kromasil色譜柱的流動(dòng)相均應(yīng)過(guò)濾，但在實(shí)際操作上應(yīng)視具體情況而有所區(qū)別 。

　　3、凈化樣品 ：樣品中含有對(duì)kromasil色譜柱有損害的化學(xué)成分，如產(chǎn)生吸附的蛋白質(zhì)、糖等有機(jī)分子和強(qiáng)吸附性物質(zhì),以及可能對(duì)柱填料產(chǎn)生破壞作用的基團(tuán)離子。在進(jìn)樣前應(yīng)盡可能對(duì)樣品進(jìn)行分離提純以除去多余雜質(zhì)組分。

　　4、避免過(guò)高的柱壓 ：避免的方法為(1)柱壓過(guò)高時(shí)，盡可能采用較小的流速，以不超過(guò)柱zui大允許壓力的一半為宜。(2)當(dāng)流速較大時(shí)，應(yīng)采取流速梯度的辦法使流速分步到位。(3)使用手動(dòng)進(jìn)樣閥時(shí)，進(jìn)樣閥的切換要盡可能的快。

　　5、注意溫度和酸堿度 ：一般以硅膠為基質(zhì)的kromasil色譜柱zui高使用溫度不超過(guò)60℃，以低于40℃為宜，特別是在流動(dòng)相pH接近使用限度時(shí)，更應(yīng)降低使用溫度。目前的鍵合硅膠kromasil色譜柱標(biāo)示的pH適用范圍可達(dá)2~10，但在實(shí)際使用時(shí)應(yīng)避免的pH條件，特別是在偏堿性的條件(pH≥8)下使用。如必須要在的pH條件下使用時(shí)，可通過(guò)以下方法避免柱損害：(1)在泵和進(jìn)樣閥之間加裝預(yù)柱(飽和柱)來(lái)飽和流動(dòng)相；(2)降低使用溫度；(3)檢驗(yàn)完畢后立即用與所使用的流動(dòng)相互相混溶的“溫和溶劑”*清洗。